Un grupo de investigadores de la Universidad de Juntendo en Tokio, Japón, desarrolló un método innovador de inmunohistoquímica 3-D (3D-IHC) basada en nanocuerpos. Lo más sorprendente es que permite la visualización rápida y de alta resolución de neuronas y glías en muestras de tejido cerebral grueso.
Este nuevo método, denominado POD-nAb/FT-GO 3D-IHC, aborda las limitaciones de las técnicas tradicionales de 3D-IHC, que son lentas y tienen una penetración limitada en tejidos profundos.
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Pero antes, ¿qué es la inmunohistoquímica?
La Inmunohistoquímica es una técnica de laboratorio crucial en el campo de la patología y la investigación biomédica. Su objetivo principal es detectar, identificar y localizar antígenos específicos (generalmente proteínas) en muestras de tejido o células.
Se trata de una herramienta poderosa que, al visualizar la presencia de proteínas específicas en los tejidos, proporciona información vital para el diagnóstico, pronóstico y tratamiento de diversas patologías.
Los puntos más importantes de la inmunohistoquímica 3D
Al igual que ocurre en todos los campos de la medicina, de manera constante aparecen nuevas técnicas que superan a las anteriores. Tal es el caso de la inmunohistoquímica 3D porque no sólo acelera los tiempos sino que mejora los resultados para visualizar células y moléculas en tejidos intactos.
- Velocidad y Profundidad Mejoradas: La técnica utiliza nanocuerpos (~15 kDa) fusionados con peroxidasa (POD-nAbs), que penetran el tejido de manera más eficiente que los anticuerpos convencionales (~150 kDa). Esto permite etiquetar neuronas y glías en tejidos cerebrales de 1 mm de espesor en solo tres días, una fracción del tiempo que requieren las técnicas tradicionales.
- Sistema de Amplificación de Señal: El método incorpora un sistema de amplificación de señal fluorescente llamado Fluorochromized Tyramide-Glucose Oxidase (FT-GO). Esta combinación de POD-nAbs y FT-GO proporciona una intensidad de señal hasta nueve veces mayor a profundidades de tejido de 500 micras en comparación con los métodos estándar, lo que facilita el análisis de alto rendimiento.
- Aplicaciones Versátiles: La técnica ha demostrado ser efectiva en la identificación de proteínas exógenas y endógenas, e incluso reveló la activación de microglía alrededor de las placas beta-amiloides en modelos de ratones con la enfermedad de Alzheimer. Esto sugiere un gran potencial para el estudio de enfermedades neurodegenerativas, microambientes tumorales y la dinámica de las células inmunes. La capacidad de apagar la actividad de la peroxidasa con NaN3 también permite el multi-etiquetado de tejidos 3D, aumentando la versatilidad.
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¿En dónde se publicó la investigación?
Autores y Publicación: El estudio titulado “A Three Dimensional Immunolabeling Method with Peroxidase-fused Nanobodies and Fluorochromized Tyramide-Glucose Oxidase Signal Amplification”, fue publicado el 18 de junio de 2025 en la revista Communications Biology. Los autores principales son el Profesor Asistente Kenta Yamauchi y el Profesor Hiroyuki Hioki, ambos de la Universidad de Juntendo.
A pesar de sus ventajas, el método presenta algunas limitaciones, como la disminución de la homogeneidad de la señal en tejidos de más de 1 mm de espesor y la dificultad en las comparaciones cuantitativas de la expresión de antígenos debido a la naturaleza no lineal de la amplificación enzimática. La disponibilidad limitada de nanocuerpos adecuados para el etiquetado histoquímico también es un desafío, aunque se espera que mejore.
Los investigadores son optimistas sobre el impacto de su técnica, ya que podría establecer un nuevo estándar en la toma de imágenes volumétricas de tejidos biológicos, abriendo nuevas puertas para la neurociencia básica, el diagnóstico clínico y el descubrimiento de fármacos.
